2013-2014学年高二生物课件:3.1 酶的制备及活力测定(中图版选修1).ppt
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- 2013-2014学年高二生物课件:3.1 酶的制备及活力测定中图版选修1 2013 2014 学年 生物 课件 3.1 制备 活力 测定 图版 选修
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1、课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测第一节酶的制备及活力测定课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测课程标准1研究酶的存在和简单制作方法。2尝试利用酶活力测定的一般原理和方法。课标解读1了解酶的合成、作用与分布。2理解提取和制备酶的简单方法。3掌握酶活力测定的一般原理、方法及影响因素。课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测(1)酶的合成酶是在生物体_中合成的。(2)酶的分布多数酶在_直接参与生物化学反应,少数的酶要分泌到_发挥作用。酶的提取与酶活力的测定方法1酶的提取活细胞细胞内细胞外课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测(3)酶的提取提取细胞内的酶,可用_、_或_等机械将组织细胞破碎,经_、_制备成
2、粗酶液;提取分泌到细胞外的酶,如_、_等,可以直接从动物_或细胞外的_中提取。(1)酶活力的表示方法酶的活力通常以单位时间内_或者在单位时间内_来表示。(2)测定酶活力原因在提取过程中,_等多种环境条件都可能影响酶的_,导致酶_,直至丧失_。2酶的活力及测定破碎仪研磨器匀浆器过滤离心唾液淀粉酶胰蛋白酶分泌物组织间隙底物的消耗量产物的生成量温度、酸碱性空间结构变性活力课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测1酶的分布与提取项目内容分布多数酶直接在细胞内催化相关化学反应的进行,称为胞内酶少数的酶分泌到细胞外面,催化相关化学反应的进行,称为胞外酶,如各种消化酶等提取细胞破碎法:用破碎仪、研磨器或匀浆器等
3、机械将组织细胞破碎,使酶从活细胞中释放出来,进入细胞外的溶液中,经过滤、离心制备成粗酶液直接提取法:直接从动物分泌物或细胞外的组织间隙中提取(如唾液淀粉酶、胰蛋白酶等)课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测分光光度法是通过直接测定溶质对光的吸收能力来确定溶液浓度的方法。测定过程如下:配制梯度浓度标准溶液;测出标准溶液的吸光值:在分光光度计上,选取特定的波长,测出上述各溶液的吸光值;绘制标准曲线:以各种标准溶液的浓度为横坐标,相应的吸光值为纵坐标,在方格坐标纸上绘制标准曲线;测定待测样品的吸光值;查找浓度,计算物质的含量:根据测出的吸光值,在标准曲线上查找它的对应浓度,计算待测物质的含量。2.酶活
4、力的测定方法分光光度法课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测下列各项能表示酶活性高低的是 ()。A单位时间、单位体积内反应物的总量B一段时间后生成物的总量C一段时间后,一定体积中消耗的反应物的量D单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量解析 酶活性的高低可以用在一定条件下,酶所催化的某一化学反应的反应速率表示,而酶反应速率是指单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量。答案D【巩固1】课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测植物淀粉酶的制备及活力测定(1)提取酶液:称取2 g萌发的_种子,加1 g _,研磨成匀浆,倒入25 mL的_中,加_稀释定容至25 mL,在_下放置1520
5、min,然后以3 000 r/min离心5 min,取出上清液(内含淀粉酶)。将其中一部分上清液在_,使酶失活。(2)滴加酶液:取4支试管,编号1、2、3、4。向1、2号试管中各加入_1 mL;向3、4号试管中加入_ 1 mL。酶的制备与活力测定的过程水稻石英砂刻度试管蒸馏水室温沸水中水浴加热未煮过的新鲜酶液已煮过的失活酶液课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测(3)恒温处理:将4支试管_放入_恒温水浴锅中保温15 min,再向各试管分别加入_下预热的质量分数为1%的淀粉溶液2 mL,摇匀后立即放入_ 水浴中保温5 min。(4)钝化处理:取出试管,向各试管同时加入4 mL 0.4 mol/L的
6、质量浓度为0.4 mol/L _ 4 mL,以钝化_ _,使反应_。(5)测定吸光值:从4支试管中各取2 mL溶液,分别放入25 mL具塞_中,再加入2 mL_试剂,混匀、煮沸、冷却后用蒸馏水稀释至25 mL混匀。分别移入4支_,用_在波长_ nm处进行_,记录_并记算平均值。同时404040NaOH溶液酶的活终止性刻度试管3,5二硝基水杨酸比色杯分光光度计520比色吸光值课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测(6)绘制_。(7)查找_含量。(8)计算淀粉酶的活力。标准曲线麦芽糖课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测1酶的制备名称方法步骤制备植物淀粉酶 称量研磨稀释定容离心取上清液制备过氧化氢酶
7、称量切碎研磨离心取上清液特别提醒 萌发的水稻种子或小麦种子都是制备植物淀粉酶的一些好材料。制备过氧化氢酶时,选取新鲜的动物肝脏、马铃薯块茎或萝卜块根均可。课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测(1)原理淀粉酶活力的大小与产生的麦芽糖的量成正比。麦芽糖与3,5二硝基水杨酸试剂反应,生成黄褐色产物。用标准浓度的麦芽糖溶液制作标准曲线,用分光光度法测定淀粉酶作用于淀粉后生成的麦芽糖的量,以单位重量样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力。(2)活动程序提取酶液滴加酶液恒温处理(注意保温温度和时间)2用分光光度法测定淀粉酶活力课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测钝化处理:用0.4 mol/L NaOH
8、处理。测定吸光值(注意加入的试剂以及呈现的颜色)。绘制标准曲线(用分光光度计在波长520 nm处进行比色,记录吸光值,以吸光值为纵坐标、麦芽糖含量为横坐标,绘制标准曲线(其中0.0 mL管为空白对照)。课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测式中:A为淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖量(在标准曲线上查得,mg);A为淀粉酶的对照管中的麦芽糖量(mg);V为比色时所用样品液体积(mL);t为酶促反应时间(min)。特别提醒需将提取的一部分酶液进行灭活处理,即取一部分上清液在沸水中水浴加热,使其中的酶失活,以备对照。原理:过氧化氢酶可以催化H2O2分解为水和氧,其反应如下:3用高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶的
9、活力课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测如果在反应系统中加入适当过量的过氧化氢溶液,经过酶促反应后,在酸性条件下,用标准高锰酸钾溶液滴定多余的H2O2,反应如下:5H2O22KMnO44H2SO45O22KHSO48H2O2MnSO4根据消耗的H2O2的量计算出过氧化氢酶的活力。酶活力用每克鲜重样品1 min内分解H2O2的毫克数表示。课堂互动探究热点考向示例随堂达标检测式中:A为对照KMnO4滴定毫升数(mL),B为酶反应后KMnO4滴定毫升数(mL);VT为提取酶液总量(mL);VS为反应时所用酶液量(mL),W为样品鲜重(g);t为反应时间(min);1.7为换算系数,即每消耗1 mL物
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