临床医学检验技术初级（士）（临床免疫学及检验）-试卷1.pdf

1、 临床医学检验技术初级【士】【临床免疫学及检验】-试卷 1(总分：58 分，做题时间：90 分钟)一、A3 型题(总题数：1，score:8 分)ELISA 是利用酶催化反应的特性来检测和定量分析免疫反应。【score:8 分】(1).ELISA 中常用的标记物【score:2 分】【A】超氧化物酶 【B】辣根过氧化物酶【此项为本题正确答案】【C】酸性磷酸酶 【D】葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 【E】乳酸脱氢酶 本题思路：(2).ELISA 中的酶结合物是指【score:2 分】【A】免疫复合物 【B】结合在固相载体上的酶 【C】酶与免疫复合物的结合 【D】酶标记抗原或抗体【此项为本题正确答案】【E

2、】酶与底的结合 本题思路：(3).ELISA 中常用的固相载体【score:2 分】【A】聚苯乙烯【此项为本题正确答案】【B】尼龙网 【C】三聚氧胺 【D】硝酸纤维膜 【E】醋酸纤维膜 本题思路：(4).ELISA 中常用的供氢体底物【score:2 分】【A】叠氮钠 【B】邻苯二胺【此项为本题正确答案】【C】联苯胺 【D】硫酸胺 【E】过碘酸钠 本题思路：辣根过氧化物酶是 ELISA 中常用的标记物，聚苯乙烯是常用的固相载体，邻苯二胺(OPD)是应用最多的底物。二、B1 型题(总题数：1，score:8 分)A邻苯二胺(OPD)B过氧乙酸 C四甲基联苯胺(TMB)D对-硝基苯磷酸酯 E4-甲

3、基伞酮基-R-D 半乳糖苷(4-MUU)【score:8 分】(1).HRP 最敏感的色原底物，显色反应需避光，且具有致癌性的是【score:2 分】【A】【此项为本题正确答案】【B】【C】【D】【E】本题思路：(2).测量时需用荧光计的是【score:2 分】【A】【B】【C】【D】【E】【此项为本题正确答案】本题思路：(3).经 HRP 作用后变为蓝色，加入硫酸终止反应后变为黄色的是【score:2 分】【A】【B】【C】【此项为本题正确答案】【D】【E】本题思路：(4).经 AP 作用后呈黄色产物的是【score:2 分】【A】【B】【C】【D】【此项为本题正确答案】【E】本题思路：HR

4、P 最敏感的色原底物，在 HRP 的作用下显橙黄色，加强酸如硫酸或盐酸终止反应后呈棕黄色，最大吸收峰在 492nm 波长。其反应液稳定性差，易变色，需在配置后 1 小时内使用，显色反应过程需避光，且具有致癌性。4-甲基伞酮基-R-D 半乳糖苷(4-MUU)常用作-半乳糖苷酶(-Gal)的底物，酶作用后生成高强度荧光物 4-甲基伞形酮(4-Mu)，测量时需用荧光剂。TMB 经 HRP 作用后变为蓝色，加 入硫酸终止反应后变为黄色，最大吸收峰波长为450nm。对一硝基苯磷酸酯经 AP 作用后产物为黄色对硝基酚，最大吸收峰波长为 405nm。三、A1 型题(总题数：21，score:42 分)1.目

5、前临床运用较多的检测乙肝病毒 e 抗体(HBeAb)和乙肝病毒核心抗体(HBcAb)的方法是【score:2 分】【A】双抗体夹心法 【B】竞争法【此项为本题正确答案】【C】间接法 【D】捕获法 【E】双位点一步法 本题思路：抗体的检测一般不采用竞争法，但当相应抗原材料中含有与抗人 IgG 反应的物质，而且不易得到足够的纯化抗原或抗原的结合特异性不稳定时，可采用这种方法测定抗体，是目前临床运用较多的检测乙肝病毒 e 抗体(HBeAb)和乙肝病毒核心抗体(HBcAb)的检测。2.目前最常用的检测病原体急性感染诊断 IgM 抗体的方法是【score:2 分】【A】双抗体夹心法 【B】竞争法 【C】

6、间接法 【D】捕获法【此项为本题正确答案】【E】双位点一步法 本题思路：捕获法又称反向间接法，主要用于血清中某种抗体亚型成分(如 IgM)的测定，目前是最常用的检测病原体急性感染诊断中的 IgM 型抗体。3.酶免疫技术的基本原理是【score:2 分】【A】酶与抗体或抗原的蛋白分子共价结合，且不影响抗原抗体反应的特异性【此项为本题正确答案】【B】酶具备抗体特异性 【C】酶具备反应原性 【D】酶具备抗原特异性 【E】酶具备特异性 本题思路：酶免技术主要基于抗原与抗体的反应基础上。4.目前在 ELJSA 中应用最广泛的底物是【score:2 分】【A】OPD 【B】ABTS 【C】TMB【此项为本

7、题正确答案】【D】5-ASA 【E】p-NPP 本题思路：邻苯二胺灵敏度高，比色方便，是 ELISA中应用最早的底物，但稳定性差，反应过程需要避光，还具有致癌性；四甲基联苯胺稳定性好，反应无需避光，没有致突变作用，是目前应用最广泛的底物，但是水溶性差。5.酶免疫技术的特点，下面哪项是正确的【score:2 分】【A】酶标记物催化抗原抗体反应，使其结果被放大，提高了检测灵敏度 【B】酶活性易受理化因素影响，酶标记物稳定性差 【C】底物经酶催化后的成色，使酶标记免疫反应结果得以放大【此项为本题正确答案】【D】选择高质量的标记用酶是建立方法最重要的前提 【E】标记酶分子量大，稳定性好 本题思路：酶免

8、疫技术是利用酶催化底物反应的生物放大作用，提高特异性抗原抗体免疫学反应检测敏感性的一种标记免疫技术。该技术所用的酶要求纯度高、催化反应的转化率高、专一性强、性质稳定、来源丰富、价格不贵、制备成的酶标抗体或抗原性质稳定，继续保留着它的活性部分和催化能力。最好在受检标本中不存在与标记酶相同的酶。6.TMB 经 HRP 作用后变为蓝色，加入硫酸终止反应后变为黄色，最大吸收峰波长为【score:2 分】【A】280nm 【B】405nm 【C】450nm【此项为本题正确答案】【D】492nm 【E】630nm 本题思路：OPD 在 HRP 作用下显橙黄色，加强酸终止反应呈棕黄色，最大吸收峰波长为 49

9、2nm。TMB 经HRP 作用后变为蓝色，加入硫酸终止反应后变为黄色，最大吸收峰波长为 450nm。p-NPP 经 AP 作用后的产物为黄色对硝基酚，最大吸收峰波长为 405nm。7.标记抗体具有种属内通用性的 ELISA 方法是【score:2 分】【A】双抗体夹心法 【B】间接法【此项为本题正确答案】【C】一步法 【D】竞争法 【E】捕获法 本题思路：间接法标记抗体，具有种属内的通用性。8.用于标记的酶应符合的要求中，以下哪项可以除外【score:2 分】【A】酶活性高 【B】具有可与抗原、抗体结合的基团 【C】具有可与生物素、亲合素结合的基团【此项为本题正确答案】【D】酶催化底物后的成色

10、信号易判断 【E】纯度及比活性高 本题思路：标记酶应该具有酶活性高；可与抗原、抗体结合的基团；纯度及比活性高；酶催化底物后的成色信号易判断。9.根据什么特性将酶免疫技术分为均相和异相两类【score:2 分】【A】抗原特性 【B】抗体特性 【C】酶的稳定性 【D】载体的特性 【E】抗原抗体反应后是否需要分离结合的和游离的酶标记物【此项为本题正确答案】本题思路：酶免疫技术均相和异相的分类是根据是否需要分离结合及游离标记物。10.以下哪种复合物的形成属于间接法 ELISA 免疫反应结果【score:2 分】【A】固相抗原-抗体-酶标二抗【此项为本题正确答案】【B】固相抗体-抗原-酶标抗体 【C】固

11、相二抗-IgM 抗原一酶标抗体 【D】固相抗体-酶标抗原 【E】固相抗体-沆原-抗体-酶标抗体 本题思路：间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体(抗人免疫球蛋白抗体)以检测与固相抗原结合的受检抗体，故称为间接法。11.ELISA 技术中，最常用来检测抗原的方法是【score:2 分】【A】双抗体夹心法【此项为本题正确答案】【B】间接法 【C】竞争法 【D】捕获法 【E】B+D 本题思路：检测抗原常用双抗体夹心法检测。12.目前用于 HRP 标记抗体或抗原的最常用的方法是【score:2 分】【A】戊二醛交联一步法 【B】戊二醛交联二步法 【C】直接法 【D】间接法 【E】改良过

12、碘酸钠法【此项为本题正确答案】本题思路：改良过碘酸钠法是目前用于 HRP 标记抗体或抗原的最常用的方法。13.ELISA 板包被后，最常用的封闭物质是【score:2 分】【A】人白蛋白 【B】人球蛋白 【C】牛血清白蛋白【此项为本题正确答案】【D】牛血清球蛋白 【E】鼠白蛋白 本题思路：EL,ISA 板包被后，需用 15的牛血清白蛋白或 520的小牛血清再包被一次，消除非特异显色的干扰，此过程称为封闭。14.如果标本中存在 NaN 3 可能会导致【score:2 分】【A】假阴性【此项为本题正确答案】【B】假阳性 【C】灵敏度增加 【D】特异性增加 【E】临界值下降 本题思路：NaN 3 破

13、坏 HRP 的结构与活性。15.ELISA 双位点一步法检测中，若怀疑存在钩状效应，应采取何种措施【score:2 分】【A】增加酶标抗体的含量 【B】缩短孵育时间 【C】增加洗板次数 【D】降低孵育温度 【E】将标本稀释后重新检测【此项为本题正确答案】本题思路：在双位点一步法中，当待测抗原浓度过高时，过量的抗原可分别同固相抗体和酶标抗体结合而抑制夹心复合物的形成，出现钩状效应，只有将标本稀释后重新检测才有可能得到准确的试验结果。16.ELISA 不用于下列哪种检测【score:2 分】【A】血型鉴定【此项为本题正确答案】【B】病原体及抗体的检测 【C】免疫球蛋白、补体、肿瘤标志物等蛋白质的检

14、测 【D】毒品的检测 【E】药物的检测 本题思路：ELISA 广泛用于病原体及抗体的检测，免疫球蛋白、补体、肿瘤标志物等蛋白质的检测，非肽类激素的检测，药物的检测，毒品的检测，但血型鉴定一般采用凝集试验。17.化学发光剂必须具备的条件错误的是【score:2 分】【A】其物理、化学特性要与被标记或测定的物质相匹配 【B】能与抗原或抗体形成稳定的耦联结合物 【C】其化学发光常是还原反应的结果【此项为本题正确答案】【D】在所使用的浓度范围内对生物体没有毒性 【E】发光的量子产量高 本题思路：能作为化学发光剂的有机化合物必须具备下列条件：发光的量子产量高；它的物理、化学特性要与被标记或测定的物质性匹

15、配；能与抗原或抗体形成稳定的耦联结合物；其化学发光常是氧化反应的结果；在所使用的浓度范围内对生物体没有毒性。18.下列不属于发光剂标记方法的是【score:2 分】【A】聚乙二醇(PEG)沉淀法【此项为本题正确答案】【B】过碘酸钠氧化法 【C】重氮盐耦联法 【D】N-羟基琥珀酰亚胺活化法 【E】碳二亚胺缩合法 本题思路：小分子物质(如药物、激素等)的标记主要是通过耦联反应制备；生物大分子的标记是利用交联剂使标志物与被标志物分子结构中游离的氨基、硫氢基、羟基等基团形成不可逆的连接。常用的标记方法有：碳二亚胺缩合法、过碘酸钠氧化法、重氮盐耦联法、N-羟基琥珀酰亚胺活化法。19.下列不会影响标记的因

16、素是【score:2 分】【A】被标记蛋白质的性质 【B】原料比 【C】温度 【D】湿度【此项为本题正确答案】【E】标记率 本题思路：影响标记的因素包括：发光剂的选择。被标记蛋白质的性质。抗原作为被标志物时，应具有较高的纯度和免疫学稳定性；抗体作为被标志物时，则要求具有较高的效价，应用提纯的 IgG 来代替全血清)。标记方法的选择(应正确选择与发光剂和被标志物结构相适应的耦联方式)。原料比。在制备发光剂-IgG(抗体)结合物时，IsG：发光剂：交联剂的克分子比(mol：mol：mol)会影响结合物的发光效率。标记率。是指结合物中 IgG 与发光剂之间的克分子比。由于每一种发光剂对应于被标志物都

17、有特定的最佳标记率，标志物选择不好，会出现不易保存等现象。温度。控制标记时的反应温度极为重要，对于较稳定的小分子被标志物，温度可稍放宽些；而当被标志物是抗原或抗体蛋白质时，由于蛋白质对热的不稳定性，应在保证标记反应进行的前提下，尽量选择较低的温度，以避免蛋白质在标记过程中活性的丧失。纯化与保存。多数经耦联反应制备的结合物，使用前都需进行纯化，除去未结合的发光剂和交 联剂。结合物一般可分装保存在-70条件下，最好冷冻干燥保存。20.不需酶催化反应即可发光的发光底物是【score:2 分】【A】吖啶酯【此项为本题正确答案】【B】三联吡啶钌 【C】鲁米诺或其衍生物 【D】4-MUP 【E】AMPPD 本题思路：吖啶酯化学发光特点：推动发光的氧化反应简单快速，不需要催化剂，只要在碱性环境中即可进行；反应体系中加入 H 2 O 2 和 NaOH 溶液后，发光迅速，背景噪声低，保证了测定的敏感性；吖啶酯可直接标记抗原或抗体，结合稳定，不影响标志物的生物学活性和理化特性；吖啶酯发光为瞬间发光，持续时间短，因此对信号检测仪的灵敏度要求比较高。21.不属于直接化学发光免疫分析化学发光剂特点的是【score:2 分】【A】氧化反应简单快速，不需要催化剂 【B】发光迅速，背景噪声低 【C】可直接标记抗原或抗体 【D】只需在酸性环境中即可进行【此项为本题正确答案】【E】为瞬间发光，持续时间短 本题思路：