动物的克隆----动物的细胞融合技术及其应用.docx

1、第二章 克隆技术第三节 动物的克隆-动物的细胞融合技术及其应用【学习目标】1. 说出动物细胞融合技术的概念、原理及方法。2. 辨别细胞融合与细胞杂交。3. 简述单克隆抗体的制备过程。【学习重难点】1. 重点：动物细胞融合技术的概念、原理及方法；辨别细胞融合与细胞杂交；单克隆抗体的制备过程。2. 难点：辨别细胞融合与细胞杂交；单克隆抗体的制备过程。【课前导忆】写下植物体细胞杂交（原生质体融合）的原理和诱导方法。动物细胞克隆培养的方法和要求。【课堂任务】任务一：请阅读p31，完成以下问题细胞融合的概念： 细胞杂交的概念： 细胞融合的诱导方法： 植物原生质体融合、动物细胞融合的比较比较项目植物原生质

2、体融合动物细胞融合原理诱导方法任务二：选择下列材料，为制备针对肝癌细胞的单克隆抗体提供思路艾滋病病毒、艾滋病病毒抗原、肝癌细胞、肝癌细胞抗原小鼠、小鼠骨髓瘤细胞、兔子骨髓瘤细胞细胞培养液（细胞分离和培养、抗体分离的具体方法不作要求）【归纳总结】细胞融合： 概念 细胞杂交： 原理：动物细胞的融合 物理： 诱导方法 化学： 生物：应用：【课堂练习】1、 人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答：(1)制备单克隆抗体过程中要用到_和_技术。(2)制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于_，使小鼠产生分泌相应_的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的_免疫。(3) 在细胞内DNA合成一般有两条途径，主途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基喋呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化作用合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的_成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_。(4) 此过程生产的单克隆抗体可以与_特异性结合，从而诊断早孕。