2013-2014学年高中生物人教版选修一同步辅导与检测课件：专题5 课题1　DNA的粗提取与鉴定.ppt

1、金品质高追求我们让你更放心！生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)课题1DNA的粗提取与鉴定DNA和蛋白质技术金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)DNA的提取是现代生物技术进行中药鉴别的最关键步骤。总DNA的有效提取要求材料中的DNA尽可能少的降解。但用于生药真实性鉴别的药材在干燥、加工、贮藏等过程中均造成了DNA不同程度的降解，一般DNA的含量也比较低。药材中次生代谢产物含量较高，会干扰

2、提取。另外也可能有微生物引起的外源DNA的污染。DNA的质量将直接关系到实验的成败。不同的研究目的对DNA的纯度和量的要求不尽相同。本课题将为你提供从生物体内直接提取DNA的机会。金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)知识清单DNA的粗提取和鉴定1DNA的粗提取(1)基本思路：利用DNA与_、_和_等在物理和化学性质方面的_，提取DNA，去除其他成分。(2)方法和原理DNA和_等其他成分在不同浓度的_溶液中溶解度不同，利用

3、这一特点选择适当的_就能使DNA充分溶解，而使_沉淀，或者相反，以达到分离目的。1(1)RNA 蛋白质 脂质 差异(2)蛋白质 NaCl 盐浓度 杂质金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)DNA不溶于_，但是某些_则可溶于其中。_能水解蛋白质，但是对_没有影响。大多数蛋白质不能忍受_的高温而发生变性，而DNA在_以上才会变性。_能瓦解细胞膜，但对DNA无影响。2DNA的鉴定在沸水浴的条件下，DNA遇_会被染成蓝色。酒精 蛋白质 蛋白酶 DNA6080 80洗涤剂2二苯胺金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1

4、(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)尝试应用1DNA在下列浓度的NaCl溶液中，溶解度最低的是()A2 molL1B0.015 molL1C0.14 molL1 D5 molL1解析：DNA在2 mol/L NaCl溶液中溶解度最高，在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低，并且DNA在冷却的酒精溶液中会析出白色丝状物。答案：C金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)D2鉴定DNA的试剂及出现的颜色反应是()A斐林试剂、砖红色B苏丹染液、橘黄色C双缩脲试剂、紫色D二苯胺试剂、蓝色金品质高追求我们让你更放心！返

5、回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)知识清单实验设计1选取实验材料：选用_的生物组织，成功的可能性更大。2破碎细胞，获取含DNA的滤液：动物细胞的破碎比较容易，例如，在鸡血细胞液中加入一定量的_，同时_，过滤后收集滤液即可。如果是植物细胞，需要先用_溶解_。3去除滤液中杂质(1)方案一：通过控制_的浓度去除_。1DNA含量较高2蒸馏水 用玻璃棒搅拌 洗涤剂 细胞膜3(1)NaCl溶液 杂质 金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)(2)方案二：直接向滤液中加入_，反应1015 min，_中

6、的_能够分解蛋白质。(3)方案三：将滤液放在_的恒温水浴箱中保温1015 min，注意严格控制温度范围，使_沉淀析出而_分子还未变性，可以将DNA与蛋白质分离。4DNA的进一步提纯利用DNA不溶于冷却的_这一原理，可从_中析出较纯净的DNA，此时DNA的状态为_。(2)嫩肉粉 嫩肉粉 木瓜蛋白酶(3)6075 蛋白质 DNA495%酒精 滤液 白色丝状物金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)5DNA的析出与鉴定(1)DNA的析出：DNA的析出用的是与滤液体积相等的、_的_溶液。(2)DNA鉴定：鉴定DNA时在试管中先加入物质的

7、量浓度为_的NaCl溶液5 mL。两支试管中其中一支加入DNA丝状物，各加入二苯胺_。在沸水浴的条件下，DNA遇_会被染成蓝色，因此_可以作为鉴定DNA的试剂。5(1)冷却 酒精(2)2 mol/L4 mL 二苯胺 二苯胺金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)5DNA的析出与鉴定(1)DNA的析出：DNA的析出用的是与滤液体积相等的、_的_溶液。(2)DNA鉴定：鉴定DNA时在试管中先加入物质的量浓度为_的NaCl溶液5 mL。两支试管中其中一支加入DNA丝状物，各加入二苯胺_。在沸水浴的条件下，DNA遇_会被染成蓝色，因此_

8、可以作为鉴定DNA的试剂。5(1)冷却 酒精(2)2 mol/L4 mL 二苯胺 二苯胺金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)尝试应用1提取DNA最好不要选用的材料是()A鸡血B花椰莱C鱼卵D羊血解析：哺乳动物成熟的红细胞中已经没有了细胞器和细胞核，所以不能选用成熟的哺乳动物红细胞作为提取DNA的原料。答案：D金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)2在DNA的粗提取实验过程中，有两次DNA沉淀析出，其依据的原理是()DNA在物质的量浓度为0.14 mol/L的

9、NaCl溶液中溶解度最低 DNA在冷却的体积分数为95%的酒精中能沉淀析出A两次都是B两次都是C第一次是，第二次是D第一次是，第二次是C金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)一、提取DNA选用鸡血，不用哺乳动物血的原因哺乳动物成熟的红细胞不含细胞核，不能用作提取DNA的材料；而鸡血细胞的细胞核中DNA含量丰富，材料易得，是提取DNA的好材料。二、析出DNA用冷却95%酒精的原因DNA溶于一定浓度的NaCl溶液，但不溶于酒精

10、，而冷却的酒精可以降低分子运动，有利于DNA的聚合、析出，同时低温有利于增加DNA分子的柔韧性以减少断裂，便于用玻璃棒卷起，此外冷却的酒精还可以降低并抑制核酸水解酶的活性，防止DNA降解，从而提取到较多的DNA物质。可以通过设置对照实验，向含有DNA物质的滤液中分别加入等体积的体积分数为95%的冷却酒精和常温态酒精，比较最终获得的白色丝状物数量。金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)三、实验成功的关键及注意事项1破碎细胞，释放DNA过程中，若是血细胞，加水后必须充分搅拌，不应少于5 min；若是菜花，则应与研磨液混合，研磨时间

11、不少于10 min。2用冷酒精浓缩和沉淀DNA时，所用的95%的酒精，必须经过充分预冷后才能使用。3在用玻璃棒搅拌时，玻璃棒不能直接插烧杯底部，并且搅拌要轻缓，以便获得较完整的DNA分子。4由于玻璃表面带电荷，DNA中的磷酸基也带电荷而被吸附于玻璃表面，故实验中用塑料杯和试管可减少DNA的损失。金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)四、实验现象不明显的原因分析1材料中核物质没有充分释放出来，如研磨不充分或蒸馏水的量不够。2加入酒精后摇动或搅拌时过猛，DNA被破坏。3二苯胺配制时间过长，变成浅蓝色，影响鉴定效果。4析出含DNA的

12、黏稠物时，蒸馏水一次快速加入，影响实验结果。5实验中有多次搅拌，但是其目的及操作方法是不同的，操作时不注意区分，影响实验结果。金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)DNA在NaCl溶液中的溶解度有两重性，随NaCl溶液浓度的变化而变化，则下图所示能反映DNA的溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是()DNA粗提取的原理、方法金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教

13、版)解析：DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低。答案：C名师点睛：在0.14 mol/L NaCl溶液中，DNA溶解度最低，而蛋白质的溶解度较高；在高浓度的NaCl溶液中，DNA溶解度较高，而蛋白质的溶解度较低。利用这一原理，可以使DNA和蛋白质分离。金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)变式训练1蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的DNA分离出来，下列药品可达到上述同一目的的是()A蒸馏水 BNaCl溶液CNaOH溶液D盐酸解 析：本 题 为 DNA提 纯 原 理 的 应 用。DNA在0.14mol/L的Na

14、Cl溶液中溶解度最低，蛋白质可溶，从而把DNA和蛋白质分开。答案：B金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)DNA的精提取与鉴定的实验操作(多选)下表是关于DNA粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述，正确的是()试剂操作作用A柠檬酸钠与鸡血混合防止血液凝固B蒸馏水与鸡血细胞混合保持细胞形状C蒸馏水加入到溶解有DNA的NaCl溶液中析出DNA丝状物D 冷却的酒精 加入到过滤后含DNA的NaCl溶液中产生特定的颜色反应金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教

15、版)解析：在DNA粗提取与鉴定实验中，柠檬酸钠可以防止血液凝固；鸡血中加入蒸馏水可以使细胞膜和核膜破裂；DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在0.14 mol/L NaCl溶液中的溶解度最低，有利于DNA析出；DNA不溶于酒精，可以获得较纯的DNA；DNA遇二苯胺(水浴加热)产生蓝色反应。答案：AC名师点睛：在DNA析出的步骤中，用玻璃棒搅拌时，注意动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。盛放鸡血细胞液的容器，最好是塑料容器。鸡血细胞破碎以后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，由于细胞内DNA的含量本来就比较少，再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA就会

16、更少。因此，实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管，这样可以减少提取过程中DNA的损失。金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)变式训练2下列关于DNA的粗提取和鉴定的有关说法，正确的是()ADNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的增大而增大B溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL二苯胺试剂即变蓝色CDNA粗提取和鉴定时，选材最好用鸡血而不用猪血D提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，食盐有利于DNA从细胞中释放出来金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(

17、配配人教版人教版)解析：本题考查DNA的粗提取和鉴定中相关步骤的模糊点。需要对每一个选项认真分析，用排除法选择。从DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线可知，NaCl溶液在低于0.14 mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐下降，0.14 mol/L时溶解度最低，当NaCl溶液浓度继续增加时，DNA的溶解度逐渐增加。A选项只注重一段范围内的变化，不够全面。二苯胺试剂使用时需要水浴加热才能出现实验现象。猪的成熟红细胞没有细胞核，无DNA，故不能用于本实验。而提取洋葱的DNA时，食盐的作用是溶解释放出的DNA，洗涤剂的作用才是使DNA从细胞中释放出来。答案：C金品质高追求我们让你更

18、放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)水平测试1下列各项不适宜选作DNA提取材料的是()A洋葱表皮细胞 B鲜豌豆种子C人的成熟红细胞D猪肝解析：人的成熟红细胞不含DNA，不适宜用来提取DNA。答案：C金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)素能提高7DNA粗提取的实验材料中有三次过滤：(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液；(2)过滤含粘稠物的0.14mol/L NaCl溶液；(3

19、)过滤溶解有DNA的2mol/L NaCl溶液。以上三次过滤分别为了获得()A含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液B含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、含DNA的滤液C含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、纱布上的DNAD含较纯的DNA滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)解析：用蒸馏水稀释鸡血细胞液，使血细胞的细胞膜、核膜破裂，释放出核物质，此时过滤只能得到含DNA和其他物质如蛋白质的滤液，这种滤液必须经过实验中其他步骤得相继处理，方能得到较纯的DNA。DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低，成丝状粘稠物，可经过滤留在纱布上。答案：A金品质高追求我们让你更放心！返回返回生物生物选选修修1(1(生物技术实践生物技术实践)(配配人教版人教版)祝您