2020年高考生物二轮复习 专题7 生物技术实践 微专题14 微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用练习（含解析）.docx

1、14微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用1.培养基的成分比较营养物质作用主要来源碳源为微生物代谢提供碳元素,构成生物体的细胞物质,有些是异养生物的能源物质CO2、NaHCO3、糖类、脂肪酸等氮源为微生物的代谢提供氮元素,合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物N2、NH3、硝酸盐、尿素、牛肉膏、蛋白胨等生长因子是生长必不可少的,酶和核酸的组成成分维生素、氨基酸等水良好的溶剂外界摄入为微生物提供除碳、氮以外的各种元素,细胞的组成成分无机化合物2.常用消毒和灭菌方法的比较主要方法操作要点应用范围煮沸消毒法100 煮沸56 min家庭餐具等生活用品的消毒巴氏消毒法7075 煮30 min或80 煮15

2、 min牛奶、啤酒、果酒和酱油等液体灼烧灭菌酒精灯火焰灼烧微生物接种工具:如接种环、接种针或其他金属用具、试管口等干热灭菌干热灭菌箱160170 加热12 h玻璃器皿(如吸管、培养皿等)、金属用具等耐高温的物品高压蒸汽灭菌100 kPa、121 维持1530 min培养基紫外线消毒30 W紫外灯照射30 min接种室、接种箱等的消毒化学药物消毒用体积分数为70%75%的乙醇、碘酒涂抹等皮肤、伤口、动植物组织表面、手术器械、塑料或玻璃器皿等的消毒3.倒平板操作的注意事项(1)整个操作在酒精灯火焰旁进行,避免杂菌污染。(2)倒平板时,要使锥形瓶的瓶口通过火焰。通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养

3、基。4.平板划线操作的注意事项(1)操作的第一步以及每次划线之前都需要灼烧接种环,划线操作结束后仍需灼烧接种环,每次灼烧的目的如下表:项目目的第一次划线前灼烧避免接种环上可能存在的微生物污染培养物每次划线前灼烧杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使每次划线的菌种均来自上次划线的末端划线结束后灼烧杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者(2)除第一次划线外,每次划线都从上一次划线的末端开始,这样能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。(3)划线时最后一个区域不要与第一区域相连。5.平板划线法和稀释涂布平板法的比较项目平板划线法稀释涂布平板法接

4、种工具接种环涂布器操作难易程度操作较简便需要先进行梯度稀释,操作相对烦琐可否用于观察菌落特征可以可否用于计数不可以可以6.菌种的保存方法项目临时保藏法甘油管藏法适用对象频繁使用的菌种长期保存的菌种培养基类型固体斜面培养基液体培养基温度4 -20 方法菌落长成后于冰箱中保存,每36个月将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀后置于冷冻箱内保存缺点菌种易被污染或产生变异7.微生物的筛选常见的选择培养基(1)将培养基放在高温环境中培养,分离耐高温的微生物。(2)以石油为唯一碳源的培养基,可以分离能消除石油污染的微生物。(3)不含有机碳源的培养基可以分离自养型微

5、生物。(4)无氮源培养基可以分离固氮微生物。(5)加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。(6)加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。8.统计菌落数目的方法计数法可分为直接计数法和间接计数法。二者的比较如下表所示:项目直接计数法间接计数法原理利用血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积样品中微生物的数量当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,能推测出样品中大约含有多少活菌主要用具显微镜、血细胞计数板培养基计数依据菌体本身培养基上的菌落数优点计数方便、操作简单计数的是活菌缺点死菌、活菌都计算在内操作较复杂,有一定误差(续表)项目直接计数法间接

6、计数法计算公式每毫升原液含菌数=400104每小格平均菌体数稀释倍数每毫升原液含菌数=培养基上平均菌落数涂布液体积稀释倍数注:400、104是常数。9.选择培养基与鉴别培养基的比较项目选择培养基鉴别培养基特殊成分加入某种化学物质加入某种指示剂或化学药品目的抑制其他微生物生长,促进目的微生物生长与微生物的代谢产物或培养基中的成分发生特定反应用途培养、分离出特定微生物鉴别不同的微生物举例培养酵母菌和霉菌时,可在培养基中加入青霉素,抑制细菌生长;用以尿素为唯一氮源的培养基来培养尿素分解菌可用伊红美蓝培养基鉴定饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈黑色)10.尿素分解菌和纤维素分解菌的分离与鉴定

7、的比较项目尿素分解菌的分离与鉴定分解纤维素的微生物的分离与鉴定条件尿素为唯一氮源纤维素为主要碳源鉴定方法在培养基中加入酚红指示剂在培养基中加入刚果红溶液鉴定原理细菌合成的脲酶使尿素分解成氨,氨使培养基pH升高,酚红指示剂变红微生物产生的纤维素酶能使纤维素分解为纤维二糖或葡萄糖,使刚果红-纤维素复合物无法形成而出现透明圈步骤土壤取样样品梯度稀释涂布平板培养与观察土壤取样选择培养梯度稀释涂布培养挑取菌落考能1微生物的培养和无菌技术分析1.(2019年西安质检)高温淀粉酶在工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选出了能高效生产高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示。请回答下列问题:(1)号培养基

8、从物理状态来看,属于固体培养基,配制时要加入作为凝固剂,从用途来看属于选择培养基,应以为唯一碳源。(2)配制固体培养基的基本步骤是。A.计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B.计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C.计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D.计算、称量、灭菌、溶化、倒平板(3)溶化时,烧杯中加入琼脂后要不停地,防止琼脂糊底引起烧杯破裂。对培养基灭菌一般采用法。(4)过程是,过程所使用的接种方法是法。(5)部分嗜热菌在号培养基上生长时可释放分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈,挑选相应的菌落,接种到号培养基进一步分离纯化后,再对菌种进行培养。解析(1)固体培养基中通常加入琼脂作为凝固剂。本实验的

9、目的是获得高效生产高温淀粉酶的嗜热菌,故其选择培养基中应以淀粉为唯一碳源。(2)配制固体培养基的基本步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。(3)配制培养基加热溶化时,加入琼脂后要不断搅拌,防止琼脂糊底。对培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌法。(4)观察题图可知,过程是菌液稀释,过程是采用涂布平板法接种。(5)产生淀粉酶的细菌能分解淀粉,其菌落周围会出现透明圈,取这样的菌落再分离纯化可获得相应菌种,之后可以对菌种进行扩大培养用于生产。答案(1)琼脂淀粉(2)C(3)搅拌高压蒸汽灭菌(4)稀释涂布平板(5)淀粉酶扩大培养基制备与微生物纯化技术考能2微生物的纯化方法及过程分析2.(2019年成都三模)

10、牛奶是微生物的良好培养基,牛奶在饮用前需经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量的变化情况,做图1所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中,混合均匀,如此重复2次。请回答下列有关问题:图1(1)巴氏消毒的方法是,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是。(2)取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布,应选择的涂布工具是图2中的。图2(3)图1所示方法为稀释涂布平板法,理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿,菌落数分别为35个、33个、34个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数个,运用这

11、种方法统计的结果往往较实际值(填“偏大”或“偏小”),原因是。(4)消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死,若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量,则在操作步骤上应做什么改动?。(5)从生牛奶中取样培养得到的菌落中混有各种杂菌,从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加入,若菌落出现(填特征),则可以认定含有大肠杆菌。解析(1)巴氏消毒的方法是在7075煮30min或在80煮15min,这种方法可以杀死牛奶中的微生物,但不破坏牛奶的营养成分。(2)稀释涂布使用的工具是涂布器,即图2中的B。(3)菌落的平均数是34个,生牛奶中每毫升含细菌数=菌落平均数涂布量稀释倍数=340.1104=3.4106个/

12、mL。在统计菌落时,当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是单个菌落,所以运用这种方法统计的结果往往比实际值偏小。(4)由于消毒后牛奶中绝大部分细菌被杀死,所以可减少稀释次数。(5)大肠杆菌的代谢产物会使伊红美蓝鉴别培养基出现金属光泽的紫黑色。答案(1)在7075煮30min(或在80煮15min)既可以杀死牛奶中的微生物,又不破坏牛奶的营养成分(2)B(3)3.4106偏小个别菌落可能是由两个或多个细胞形成的(4)减少稀释次数(5)伊红美蓝(金属光泽的紫)黑色微生物培养中的无菌操作技术(1)常用的三种消毒方法:煮沸消毒法、巴氏消毒法及化学药剂消毒法。(2)常用的三种灭菌方法:灼烧灭菌接

13、种环、接种针等金属器具,干热灭菌主要针对玻璃器皿等,高压蒸汽灭菌主要针对培养基等。考能3微生物的分离与计数的实例分析3.(2019年惠州模拟)日前微博传言手机上的细菌比马桶中的多。下图为央视和北京卫视通过实验调查的结果。请回答下列相关问题:(1)该实验需制备培养基,培养基一般都含有水、碳源、。(2)据图,两电视台均采用法接种,该方法需要。(多选)A.接种环B.酒精灯C.移液管D.涂布器E.无菌水(3)通过观察菌落的,可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致,但报道结果截然不同,你认为可能的原因是。(4)按上图操作取样面积,实验员测定某手机屏幕的细菌数量,将10毫

14、升菌悬液进行梯度稀释,分别取0.1毫升稀释倍数为102的样品液接种到三个培养基上,培养一段时间后,统计菌落数分别为48、50、52,则该手机屏幕的细菌数为个/平方厘米。该实验对照组该如何设置?。解析(1)微生物培养基的成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐。(2)据图分析,该实验的接种方法为稀释涂布平板法,该方法用到的工具有酒精灯、移液管、涂布器、无菌水等。(3)不同的菌落形态、大小不同,图中两个电视台调查的手机屏幕和马桶按钮都有多种形态的菌落,即存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致,但报道结果截然不同,可能是因为手机的取样和马桶的取样都不相同。(4)根据提供的数据进行计算,某手机屏幕

15、的细菌数=(48+50+52)31020.110(55)=2104(个/平方厘米)。答案(1)氮源和无机盐(2)稀释涂布平板BCDE(3)形态、大小手机的取样和马桶的取样都不相同(4)2104取培养基涂布0.1mL无菌水进行培养每克样品中的菌落数的计算方法每克样品中的菌落数=(平均菌落数涂布的稀释液体积0.1mL)稀释倍数,即每克样品中的菌落数=(CV)M。C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。统计菌落数时一般选择菌落数在30300的平板。考能4选择培养基成分及配制方法的分析4.(2019年鲁鄂联考)从土壤中分离尿素分解菌和纤维素

16、分解菌,具有下列类似的操作过程:(1)过程利用的选择培养基是(填“固体”或“液体”)培养基,过程利用的选择培养基是(填“固体”或“液体”)培养基。过程对培养基的要求是;过程对培养基的要求是。(2)在过程样品梯度稀释后,一般只将稀释度为104106倍的菌液分别接种到三个平板培养基上。接种常用的方法为。(3)过程采用的鉴别方法较简单。周围出现透明圈但不能100%确定为纤维素分解菌的菌落,原因是。解析(1)将微生物接种在固体培养基上培养,才能形成菌落,所以,过程的选择培养基是固体培养基。在进行梯度稀释并接种前要用液体培养基选择培养。过程选择培养的目的是筛选尿素分解菌,所以对培养基的要求是以尿素为唯一

17、氮源;过程选择培养的目的是筛选纤维素分解菌,所以对培养基的要求是以纤维素为唯一碳源。(2)常采用稀释涂布平板(或平板划线)法,将稀释度为104106倍的菌液分别接种到三个平板培养基上。(3)刚果红可与纤维素形成红色复合物,但并不和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应。当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。所以过程采用倒平板时加入刚果红染液的鉴别方法较简单。由于不分解纤维素(如分解刚果红)的微生物菌落也可能出现透明圈,所以周围出现透明圈的菌落,不能100%确定为纤维素分解菌的菌落。答案(1)固体液体以尿素为唯一氮源以纤维素

18、为唯一碳源(2)稀释涂布平板(或平板划线)法(3)倒平板时加入刚果红染液不分解纤维素(如分解刚果红)的微生物菌落也可能出现透明圈筛选目的微生物的原理(1)原理:人为提供只有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。因此,可以通过配制选择培养基、控制培养条件等方法来筛选目的微生物。(2)考能5果酒、果醋的制作过程分析5.(2019年大庆模拟)微生物在人们的生活中无处不在,请结合所学知识回答下列问题:(1)在制作果酒过程中,发挥作用的微生物是酵母菌。在果酒制作前期,装置中的酵母菌应该处于(填“有氧”或“无氧”)条件下,同时将温度控制在左右,有利于酵母菌的繁殖

19、。(2)制作果醋所需要的微生物是,在制作果酒的酒精发酵旺盛阶段,加入该微生物能否将果汁中的糖转化为醋酸?,请说明理由:。(3)泡菜的制作离不开乳酸菌,可用培养基培养大量纯净的乳酸菌菌种。培养乳酸菌的培养基一般含有、水和无机盐等营养物质,同时还要满足等培养条件。若对获得的乳酸菌菌种进行临时保存,可将菌种接种到试管的培养基上,在合适的温度下保存。解析(1)在果酒制作前期,装置中如果有氧气,则酵母菌进行有氧呼吸,有利于酵母菌繁殖;酵母菌繁殖的最适温度为20左右。(2)制作果醋所需要的微生物是醋酸菌。在酒精发酵旺盛时,加入醋酸菌不能将果汁中的糖转化为醋酸,原因是醋酸菌在有氧、温度为3035条件下才能将

20、糖转化为醋酸,而酒精发酵条件为无氧、温度为1825。(3)培养微生物的培养基一般含有碳源、氮源、水和无机盐。答案(1)有氧20(2)醋酸菌不能醋酸菌是好氧细菌,而果酒发酵是无氧环境(或醋酸菌在有氧、温度为3035条件下才能将糖转化为醋酸,而酒精发酵条件为无氧、温度为1825)(3)碳源氮源适宜的pH和温度、无氧固体斜面关于果酒和果醋发酵需要注意的两点(1)酵母菌大量繁殖需要氧气,醋酸菌是好氧菌,所以在果酒制作的前期和果醋制作的整个过程中都需要氧气。(2)误认为果酒、果醋制作过程中都需要无氧条件。果醋制作过程中,醋酸菌进行有氧呼吸,因此需要有氧条件。A组基础过关1.(2019年乐山联考)细菌培养

21、过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌?()。A.接种环、手、培养基B.高压锅、手、接种环C.培养基、手、接种环D.接种环、手、高压锅解析灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力,对于培养基、操作器皿和接种环等都需要灭菌。消毒仅指杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害,如操作者的手和衣着需要消毒处理。高压蒸汽灭菌法通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧,可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种环的灭菌,C正确。答案C2.(2019年长沙联考)能够测定样品活菌数的方法是

22、()。A.直接计数法B.质量法C.比浊法D.稀释涂布平板法解析直接计数法是利用特定的计数板,在显微镜下计算一定容积样品中微生物的数量,但不能区分死菌与活菌,A不符合题意;质量法是用于微生物生长测定的一种方法,有湿重法和干重法,也可以通过蛋白质和DNA含量反映细胞的物质量,B不符合题意;比浊法的原理是在一定范围内,悬液中细胞浓度与混浊度呈正比,即与光密度成正比,菌越多,光密度越大,C不符合题意;活菌在适宜培养基和良好生长条件下通过生长形成菌落,可采用稀释涂布平板法接种,此法又称活菌计数法,D符合题意。答案D3.(2019年北京一模)不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一

23、碳源的自养微生物营养的描述,不正确的是()。A.氮源物质为该微生物提供必要的氮元素B.碳源物质也是该微生物的能源物质C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D.水是该微生物的营养要素之一解析碳源分为有机碳源和无机碳源。当有机物作为碳源时,既是碳源,又可作为能源;当无机物作为碳源时,只能作为碳源,不能作为能源。该碳源是CO2,属于无机物,不能作为微生物的能源物质,B错误。氮源物质为微生物提供必要的氮元素,无机盐是微生物不可缺少的营养物质,水是微生物的营养要素之一,是生命活动不可缺少的物质,A、C、D正确。答案B4.(2019年雅安考试)下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述,错误的是()。A.操

24、作顺序为计算称量溶化倒平板灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C.待培养基冷却至50 左右时倒平板D.待平板冷却凝固后将平板倒过来放置解析制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算称量溶化灭菌倒平板,其顺序不能颠倒,A错误;牛肉膏容易吸潮,所以称好后需将称量纸一同放入烧杯,当牛肉膏溶化并与称量纸分离后,用玻璃棒取出称量纸,B正确;待培养基冷却到50左右时,用手触摸锥形瓶刚刚不烫手,并且培养基处于溶化状态时开始倒平板,平板冷却凝固后才能倒置,C、D正确。答案A5.下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述,错误的是()。A.果酒和果醋的发酵菌种不同,但代谢类型相同B.制作果酒和果醋时都应用

25、体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒C.变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D.果酒和果醋的制作可用同一装置,但需控制不同的发酵条件解析果酒发酵利用的是酵母菌,酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型;果醋发酵利用的是醋酸菌,醋酸菌的代谢类型是异养需氧型,A错误。答案A6.(2019年广州模拟)右图为微生物平板划线示意图,划线的顺序为1、2、3、4、5。下列有关叙述正确的是()。A.在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌B.划线操作时完全打开皿盖,划完立即盖上C.接种时不能划破培养基,否则难以达到分离单菌落的目的D.第1区和第5区的划线最终要连接起来,以便比较前后的菌落数解析在每次划线

26、前后都要对接种环进行灭菌,但不能对培养基进行灭菌,A错误;进行划线操作时,左手将培养皿的皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖,B错误;注意接种时不能划破培养基,否则难以达到分离单菌落的目的,C正确;第1区和第5区的划线不能相连,D错误。答案C7.(2019年长春模拟)下面关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的叙述中,正确的是()。A.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素B.筛选分解尿素的细菌时,应以尿素为培养基中唯一的营养物质C.统计样品中的活菌数目一般用平板划线法D.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变蓝,则表明筛选到了分解尿素的

27、细菌解析只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,A正确;筛选分解尿素的细菌的实验中,采用的是以尿素为唯一氮源的培养基,B错误;统计样品中的活菌数目一般用稀释涂布平板法,C错误;在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,如果pH升高,指示剂变红,这样就能初步鉴定该种细菌能够分解尿素,D错误。答案A8.(2019年合肥质检)请依据所学生物技术知识,分析回答下列问题:(1)日常生活中烹饪产生的油烟冷却后形成液态的油脂,工业生产中提取玫瑰精油的原理与之相同,该提取方法是。(2)为解决生活污水中油脂对环境造成的污染。科研人员要从污水中筛选出分解油脂能力最强的微生物。请分析回答:甲图和乙图所

28、代表的方法中能对微生物进行分离和计数的是法。图乙中涂布前需对涂布器进行的操作是。对分离油脂分解菌的选择培养基成分的特别要求是。接种后,需要将培养细菌的固体培养基倒置培养的原因是。解析(1)玫瑰精油的性质稳定,难溶于水,易溶于有机溶剂,能随水蒸气一同蒸馏,因此提取玫瑰精油的方法是水蒸气蒸馏法,其原理是利用水蒸气将挥发性强的植物油携带出来。(2)根据以上分析可知,可以对微生物进行分离和计数的接种方法是稀释涂布平板法,即乙图所示方法。在稀释涂布平板法中,对于涂布器需要用酒精浸泡,然后在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却810秒。油脂分解菌具有分解油脂的能力,而其他微生物没有,因此在培养基中加入油脂作为唯

29、一碳源可以将油脂分解菌分离出来。接种后将培养细菌的固体培养基倒置培养,可以避免培养皿盖上的水珠滴入培养基,造成污染。答案(1)水蒸气蒸馏法(2)稀释涂布平板用酒精浸泡,在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却810秒以油脂为唯一碳源避免培养皿盖上的水珠滴入培养基,造成污染9.(2019年重庆诊断)北方每年在小麦丰收的季节,焚烧秸秆,火焰四起,烟雾弥漫,不但导致严重的雾霾而且造成资源的浪费。科学家为了解决这个问题,努力寻找分解秸秆中纤维素的微生物,他们做了如下实验。请据图回答:(1)根据甲图,选择培养纤维素分解菌要用培养基。为了鉴别纤维素分解菌,常在培养基中加入。为了统计样品中活菌的数目,常用的方法除稀

30、释涂布平板法外,还有的方法。(2)乙图是培养出的单菌落示意图,最适合分解秸秆的两个菌落是(填数字),纤维素分解菌将纤维素最终分解为。从图中可以看出培养基上菌落数较少,推测可能的原因是。(3)为了长期保存该微生物,可以采用的方法。解析(1)从土壤样液中筛选能分解纤维素的细菌所用的培养基是选择培养基。在培养基中加入刚果红,刚果红会与纤维素形成红色复合物,而呈现红色,如果纤维素被降解,则培养基表面会形成以纤维素分解菌为中心的透明圈,可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。统计样品中活菌的数目,常用稀释涂布平板法或显微镜直接计数法。(2)透明圈的大小反映了细菌分解纤维素能力的大小,培养基中大的透明圈

31、说明分解纤维素多,所以乙图中最适合分解秸秆的两个菌落是1和4;纤维素是多糖,最终被分解菌分解成葡萄糖;从图中可以看出培养基上菌落数较少,推测可能是土壤中纤维素分解菌较少,稀释的倍数太大所致。(3)长期保留菌种可用甘油管藏的方法。答案(1)选择刚果红显微镜直接计数(2)1和4葡萄糖土壤中纤维素分解菌较少,稀释的倍数太大(3)甘油管藏B组能力提升10.(2019年西安训练)通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述方法能从混杂的微生物群

32、体中分别分离出()。大肠杆菌霉菌放线菌固氮细菌A.B.C.D.解析缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长,而固氮细菌能生长;在培养基中加青霉素可以抑制细菌和放线菌等原核生物细胞壁的合成,而霉菌属于真核生物,故能生长;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长,对放线菌的生长无影响。综上所述,A正确。答案A11.(2019年汕头联考)大肠杆菌是与我们日常生活联系非常密切的细菌,请回答下列有关检测饮用水中大肠杆菌的问题:(1)检测饮用水中大肠杆菌的含量时,通常将样品进行一系列的梯度稀释,将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,然后记录菌落数,这种方法称为。判断下面所

33、示的4个菌落分布图中,不可能是用该方法得到的是。ABCD(2)用上述方法统计样本中菌落数时是否需要设置对照组?(填“需要”或“不需要”),其原因是需要判断培养基。对于固体培养基应采用的检测方法是将的培养基在适宜的温度下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落产生。(3)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行(填“消毒”或“灭菌”)处理;操作者的双手需要进行清洗和;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使其内蛋白质变性,还能损伤它的结构。(4)检测大肠杆菌实验结束后,使用过的培养基及其培养物必须经过处理才能丢弃,以防止培养物的扩散。解析D中菌落分布情况为平板划线法

34、所得。为判断培养基是否被杂菌污染(或灭菌是否合格),本实验需要设置对照组。可将未接种的培养基在适宜的温度条件下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落产生,若发现有菌落产生说明培养基已被污染。消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子);灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。对培养基和培养器皿要进行灭菌处理,操作者的双手需要进行清洗和用酒精消毒。答案(1)稀释涂布平板法D(2)需要是否被杂菌污染(或灭菌是否合格)未接种(3)灭菌消毒DNA(4)灭菌12.(2019年贵阳考试)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人将地衣芽孢杆菌

35、的-淀粉酶基因转入酵母菌中,经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。甲乙请回答下列问题:(1)自然界中获取的微生物,必须经过后才能应用于工业生产。(2)图甲中,过程的选择、接种需要重复几次的目的是。(3)某同学尝试过程的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是;推测该同学接种时可能的操作失误是。(4)在微生物的培养过程中,需将培养皿放在培养箱中培养,以防止冷凝水影响酵母菌的生长。(5)以淀粉为原料,在相同且适宜条件下密闭发酵时,相对于普通酵母菌菌种,接种工程酵母菌的发酵罐需要先排气,其原因是。(6)上述工程酵母菌培养过程中,下列有关操作错误的是。

36、A.接种工具用酒精灯火焰灼烧进行灭菌B.配制好的培养基分装到锥形瓶后进行高压蒸汽灭菌C.倒平板和取菌液都必须在酒精灯火焰旁进行D.获得的菌种如果需要保藏,可置于37 下恒温保藏解析(1)自然界中的微生物需要经过分离和纯化后才能应用于工业生产。(2)图甲中过程需重复几次,其作用在于“纯化”,从而进一步筛选出分解淀粉能力更强的酵母菌。(3)图乙所示培养基平板中的菌落呈分散分布,是采用稀释涂布平板法接种的结果;然而该平板上的菌落并非“均匀分布”而是相对集中于左上侧,这可能是制作平板时“涂布不均匀”所致。(4)微生物的培养过程中,需将平板倒过来放置,放入培养箱中培养,以防止冷凝水影响酵母菌的生长。(5

37、)若以淀粉为原料,则相对于普通菌种,由于工程酵母菌转入了-淀粉酶基因,其利用淀粉的能力将更强,故发酵产生CO2的能力更强,因此需要先排气。(6)菌种的保藏方法是在4的冰箱中临时保藏或在-20的冷冻箱中长期保藏,D错误。答案(1)分离和纯化(2)筛选出可以高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(3)稀释涂布平板法涂布不均匀(4)倒置(5)工程酵母菌能够高效利用淀粉,发酵产生CO2的速度很快(6)DC组冲刺一流13.为证明青霉素在某种细菌产生抗药性过程中所起的作用是选择而非诱变,有如下实验方案。其中,平板影印是指用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上,然后不转动任何角度,“复印”至新的培养基上进行接种。请回

38、答:(1)图中扩大培养的过程中应选用(填“固体”或“液体”)培养基。利用分离法可获得A1培养皿上的菌落。(2)图中过程培养基的配方如下:成分无机盐蔗糖葡萄糖尿素牛肉膏水琼脂酚红培养基+-+-+-结合图形分析(填“能”或“不能”)得出结论:该细菌可利用尿素作为氮源。理由是。(3)B组培养基中还添加了适宜浓度的青霉素,结果如上图所示。欲证明青霉素所起的作用是选择,则应选取(A.a1B.a2C.b1或b2或b3D.任意一个)菌落继续培养在空白的A2培养皿中,待长出菌落后影印到含相同浓度青霉素的C培养皿中。(4)预测上述A2和C培养皿中菌落的生长情况(填“相同”或“不同”),由此证明青霉素所起的作用是

39、选择。(5)下列关于微生物培养的叙述,正确的是。A.实验过程中所有器皿和培养基都必须用高压蒸汽灭菌法进行灭菌B.采用划线分离时,在每次划线前都需蘸取菌液一次C.涂布分离法,单菌落更易分开,但操作更复杂解析(1)液体培养基具有进行通气培养、振荡培养的优点,在通气或在振荡的条件下,有利于营养物质的摄入以及供氧量的增加,所以有利于细胞生长,提高微生物数量。故图中扩大培养的过程中应选用液体培养基。(2)由表格内容可知,葡萄糖是碳源,尿素是氮源,但微生物也可能利用空气中的氮气作为氮源,故不能得出该细菌可利用尿素作为氮源的结论;并且培养基中未加入酚红指示剂,不能对菌种作进一步的鉴定。(3)欲证明青霉素所起

40、的作用是选择,菌种应在未添加青霉素的培养基中选择,即选择a1菌落继续培养在空白的A2培养皿中扩大培养,待长出菌落后影印到含相同浓度青霉素的C培养皿中。(4)如果A2和C培养皿中菌落的生长情况相同,则证明变异是在接触青霉素之前就已经产生了,青霉素所起的作用是选择。(5)培养基用高压蒸汽灭菌法进行灭菌,接种环等工具可灼烧灭菌,A错误;采用划线分离时,在每次划线前都要对接种环灼烧处理,目的是清除残留的菌种,如果再蘸取菌液,将达不到稀释的目的,B错误;常用接种方法中的稀释涂布平板法一般多用于筛选菌株,也可以计数和观察菌落特征,但由于需要多次稀释,操作较复杂,C正确。答案(1)液体涂布(2)不能该细菌可能利用空气中的氮气作为氮源或培养基中无酚红,无法证明该细菌分解了尿素(3)A(4)相同(5)C